如何进行细胞冻存?步骤是什么?

2017-07-15

行业热点

  细胞冻存就是通过冷冻等技术把身体细胞保存起来,以备未来不时之需,那么如何进行细胞冻存?有哪些步骤呢?

  下面友康生物小编给大家总结8步。

  1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;

  2、取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。

  3、去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;

  4、离心1000rpm,5min;

如何进行细胞冻存?步骤是什么?

  5、去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;

  6、细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;

  7、在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;

  8、冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。