间充质干细胞：脐带间充质干细胞分离怎么实现？

脐带间充质干细胞（UCMSC）分离是指通过机械、酶消化或组织培养获得单细胞悬浮液，然后通过脐带间充质培养基获得间充质干细胞的过程。由于间充质干细胞具有壁生长的特点，特别是在塑料培养瓶中，可以使用简单的塑料培养瓶去除大部分杂质细胞，获得相对较高的纯度UCMSC。

采集的新鲜脐带组织用生理盐水或平衡液清洗，必要时用含有青霉素/链霉素的生理盐水或平衡液（双抗）浸泡5~10分钟，以最大限度地降低污染风险，然后用组织均匀浆或眼科切割或在液氮中研磨组织（切割前通常机械剥离脐带外膜和血管），然后进行原始分离培养。

原代分离常用的方法有微组织块壁培养法、脐带匀浆胶原酶消化法、改良胶原酶消化法等。

为了去除杂质，100目滤网通常用于分离培养，然后通过均匀浆或酶消化细胞悬液。间充质干细胞的纯化主要采用贴壁传代培养、差速贴壁、流式细胞分离、免疫磁珠分离等方法，可获得纯度大于99%的相对均匀的间充质干细胞。

为获得合格UCMSC，合格的细胞制备用品(如无菌培养液、无毒细胞培养瓶等）必须在合格的操作环境下使用（如细胞工程实验室100级操作台），具有细胞制备技术操作技能的工作人员应严格按照《细胞分离扩增操作规范》执行。因此，分离扩增UCMSC质量标准和技术规范必须从源头上建立。

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