友康生物
2023-03-10
公司热点前两期文章我们谈到了友康GMP级间充质干细胞无血清培养基的开发思路和它培养出来的MSC的细胞干性特征。化学成分完全限定、传代能力强、可产业化生产这三个优势可以让我们的客户在药物申报以及临床研究中把安全风险尽可能地降低。我们还通过详细的数据展示了这款GMP级无血清培养基培养出来的间充质干细胞的基本特性，贴壁能力的加强、表面标志物及三系分化的稳定，显示出了这款产品在MSC基本质量中的稳定性。
间充质干细胞从开始培养到进入新药临床试验阶段，需要进行安全性评价和有效性评价，这就需要对我们培养出来的MSC做很多质量上的检测。今天这期内容我们就围绕MSC细胞的染色体核型检测来展开讨论。
一、关于核型分析
染色体是细胞分裂期高度凝集的DNA蛋白质纤维，是间期染色质结构紧密盘绕折叠的结果。
核型是指一个细胞的染色体按其大小、形态特征排列起来构成的图像。
染色体标本经显带技术处理，可使染色体长轴上显示出明暗或深浅相间的带纹，每条染色体都有独特而恒定的带纹。
染色体核型分析是一种细胞遗传学检测，可以识别染色体数量和结构异常，需要将待检细胞进行染色体数目、形态结构分析，确定其核型是否与正常核型一致。目前G显带（G Banding）染色体核型分析技术仍然是行业内的“金标准”。
二、核型分析的意义
间充质干细胞不管是直接用于治疗还是开发成干细胞制剂，都必须保证MSC的安全性。首先，MSC的来源比较多，常见的有脂肪、骨髓、脐带等，有可能因为细胞来源问题，存在异常染色体核型。此外，长时间体外培养，也有可能导致细胞出现基因变异或染色体异常。
研究表明，核型异常有可能使MSC的应用存在致瘤风险。因此，在美国食品药品管理局(FDA)关于MSC的应用程序中安全性评估提出了对MSC染色体核型检测的要求，同时核型分析的异常结果比癌基因的表达特异性更高，因此在细胞治疗资格认证中进行核型分析非常重要。
三、常见核型分析的问题
在体外培养的过程中，间充质干细胞随着传代的代次增加，有可能会出现细胞的衰老以及染色体变异。常见的比如：细胞出现染色单体和染色体断裂，染色体结构异常，出现超二倍体、亚二倍体以及多倍体，还可能出现染色体的缺失、重复、倒位、易位等情况。这些异常核型问题都有可能影响到间充质干细胞的安全性。
由于体外培养体系与体内环境并不相同，在连续传代扩增的条件下MSC能否保持染色体结构的稳定性，是其临床应用安全性的重要指标之一。大量研究表明，染色体结构的异常与各类肿瘤的发病密切相关，由于MSC移植可能存在致瘤风险，而肿瘤的发生与细胞染色体互易、缺失、插入和倒位等核型的异常改变关系密切。所以染色体核型检测对于间充质干细胞非常重要，可以精准地判断细胞是否出现任何变异或者是功能上出现异常，核型检测能够保证MSC应用的安全性。
四、友康GMP级培养基产出细胞核型分析结果
在体外培养的过程中，MSC有从组织微环境到体外培养环境的一个调整和适应的过程，一部分不适应的细胞会被淘汰，所以在前两三代，干细胞基因组有着不稳定的因素，因此我们选取P5代次进行核型分析。
在核型分析的五个指标里，染色单体和染色体断裂、结构异常、超二倍体、亚二倍体及多倍体之中，都远小于《中华人民共和国药典》给出的参考值，由此可以看出使用友康GMP级培养基得到的MSC的细胞核型是非常稳定的，其核型检测完全符合人源性干细胞产品药学研究与评价技术指导原则中的要求，细胞标本异常率完全处于安全参考值范围内，基本不存在染色体异常和遗传突变的情况，安全性值得信赖。
P5代次细胞核型分析报告
46，XX克隆核型及中期图
本期文章我们详细分析了细胞核型分析对于临床应用和药物申报的意义，通过详细的数据展示了友康GMP级MSC无血清培养基在细胞核型检测中的优势。在接下来的内容中，我们将分享这款GMP级培养基在细胞检测学上展现出来的更多优势。
