教你学会细胞冻存技术

2023-06-05

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细胞冻存是指将细胞放在低温环境,以达到减少细胞代谢的作用,从而达到对细胞进行长期储存进行保种的目的,以供后续实验或临床使用。目前,细胞冻存主要的技术为液氮冷冻法,实际冻存过程中,需要进行梯度温度冻存,并加入适量的保护剂以保证细胞内外的水分不会形成冰晶造成细胞的损伤或死亡。

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什么时候可以冻存细胞?

在准备冷冻靶细胞之前,必须确保细胞处于最佳生长状态,这可以通过以下指标进行观察:

1)培养基的颜色和浑浊情况:

培养基的颜色可以指示细胞是否过度生长(例如,如果细胞是黄色,则表示它们过度生长);介质的浑浊度通常表明存在污染,不适合冷冻。

2)细胞培养的时间:

通常,建议将新恢复的细胞冷冻约两周。如果细胞连续培养两个月以上,性状率会发生一些变化,此时的细胞不适合冷冻。

3)细胞的数目:

在冻存过程中,每只冻存管内细胞最佳浓度为5x10^6个/ml—1x10^7个/ml,高密度或低密度对细胞存活率有一定影响。当细胞数量不足时,不建议冷冻细胞。