友康生物
2024-10-16
公司热点近期友康生物多次收到客户反馈，连续传代下间充质干细胞的扩增倍数下降速率比你们宣传数据明显要快。经过友康反复排查，所有证据指向酶的使用。
胰蛋白酶是细胞培养中应用最广泛的消化试剂，主要通过消化黏附蛋白从培养皿表面释放贴壁细胞。科研领域中通常使用动物来源的胰蛋白酶，但由于杂酶和外源性病毒等安全问题并不适用于工业临床应用。目前市场上临床细胞治疗应用中广泛采用的是重组胰酶。
重组胰酶通过基因工程技术生产，不含动物源成分，避免了可能带来的潜在病毒源污染，产品安全性高，稳定性和一致性较好。市面上G品牌、L品牌的胰酶也都取得了不错的市场反响。但由于这些产品适用于有血清和无血清条件下的多种细胞系，广谱性强，因此酶活普遍较高，在对间充质干细胞等对消化酶敏感的细胞进行连续传代过程中容易出现细胞扩增倍数下降过快的问题。这无疑增加了操作难度，对客户的技术水平提出了较高要求。
基于以上原因，友康生物研发了这款干细胞温和消化酶（NC1004），采用无钙镁离子的缓冲盐溶液体系，将酶活调整到合适的范围，消除了因过度消化对细胞后期传代带来的不利影响。操作方便，容错率高，解决了在生产级的大规模培养中，消化过度、难以控制的工艺难题。
友康干细胞温和消化酶有哪些优势？
▲安全性高
微生物表达的基因重组酶，不含人源动物源成分，无任何外源病毒污染风险，极大地降低干细胞药物申报的验证工作量与申报难度。
▲作用温和
对细胞损伤极小，消化后收获细胞数量较传统胰酶回收率高10%，细胞活率高10%，在后续培养过程中细胞的扩增倍数更高。即使极限消化15min，细胞活率仍可在90%以上，大幅度提高干细胞培养过程中的成功率。
▲高效便捷
使用前不需预温，从4℃冰箱取出后直接加到细胞表面即可，即取即用，节省准备时间。消化后无需终止，使用细胞培养上清液稀释即可，降低使用成本。
▲性能稳定
由GMP级管理生产工厂制造，产品均一性稳定，内毒素含量小于0.25 EU/mL,不溶性微粒水平满足药典要求，已获美国FAD DMF备案（37790），助力药物合规申报。
“更温和、更方便、更稳定”是我们的优势。推荐广大客户在使用友康干细胞无血清培养体系培养细胞时搭配这款干细胞温和消化酶，解决您在细胞消化过程中的“疑难杂症”。如您使用的是其他品牌的消化酶，建议稀释5倍后再使用。您也可以具体咨询友康的技术支持，我们会针对性给出建议，为您的细胞保驾护航。
▲常见问题及解答
1、用无血清培养基及含血清培养基培养的干细胞，在使用温和酶消化方面有什么异同？
答：相同之处在于无论使用何种培养基，在消化前均需要使用无钙镁离子的缓冲液（BS0301）冲洗细胞。不同之处在于如果使用无血清培养基，清洗一次即可；如果使用血清培养基，则必须连续清洗细胞三次，以确保无血清残留，否则消化时间会变长。
2、干细胞温和消化酶的保存温度条件是2-8℃。如果-20℃保存会不会更好？
答：不会更好，会更差。温和酶是特殊设计的重组蛋白酶产品，蛋白结构稳定，在2-8℃条件下可稳定保存。若放置-20℃环境，必然涉及反复冻融问题，会导致该重组蛋白酶活性下降，细胞消化时间延长。
3、温和消化酶消化细胞后，需要添加胰酶抑制剂终止消化吗？
答：不需要。细胞变圆后添加2倍体积的细胞培养上清稀释即可，可极大降低用户使用成本。
4、在消化时间方面，温和消化酶与传统胰酶有什么差别？
答：温和消化酶消化时间要稍长一些。一般消化干细胞需要2-5min的时间。
5、稀释后，可以不离心去除消化酶，直接传代吗？
答：不可以。残留的消化酶会影响后续干细胞的培养过程，会导致干细胞的形态变化。
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