上期文章我们结合当前干细胞市场巨大的发展前景和多项行业扶持政策以及当前干细胞药物申报现状，阐述了友康GMP级间充质干细胞无血清培养基的开发思路。其化学成分完全限定、无需更换培养基即可传至P20并保持细胞干性的高性能、兼顾细胞大规模培养与培养性能的平衡这三个特点。助力用户从源头大幅度降低适应症开发与质量控制方面的工作量，对于客户申报药物和创新研究方面有重要的作用。

国际细胞学会曾定义间充质干细胞应至少满足三大基本要求：1、贴壁生长；2、表面标志物CD105、CD73、CD90≥95%，表面标志物CD45、CD34、CD14 或 CD11b、CD79α或 CD19、HLA-DR≤2%；3、能进行成骨细胞、成脂细胞、成软骨细胞的三系分化。本期我们将从这三个方面用基础数据来论证这款培养基培养出的间充质干细胞的基本干性。

一、贴壁生长

贴壁生长是检验间充质干细胞是否合格的重要特征，其贴壁形态呈短梭形，分裂方式以规则的纹理状生长。其中血清或血清替代物体系的MSC形态较为狭长，粒径相对较大。无血清及成分明确级别的培养基由于其对MSC生长有利的组分更加清晰，因此细胞形态学上更加立体饱满，粒径较小，相对而言每一代次的扩增倍数就更高，传代成本更低。

此外，成分明确的干细胞培养基有一大问题是贴壁能力的下降。贴壁组分的添加量与维持干细胞传代性能方面息息相关，因此市面上不少无血清培养基的细胞贴壁能力不能与血清体系相比，比较依赖TC处理较好的培养瓶，细胞工厂及更大规模的培养体系更不理想，细胞会出现大量因贴壁能力缺失导致的空洞或分裂方向错乱。

友康GMP级间充质干细胞无血清培养基彻底解决以上问题，在保障细胞分裂能力的同时改善其贴壁能力，细胞形态无论在早期还是高代次均呈现颗粒分明的短梭形，在P10以上代次仅有扩增倍数的下降，但基本没有呈片状老化的细胞，同时能够适应大部分的大规模培养体系。

P1代次

P13代次

复苏培养的P10代次

细胞工厂培养

二、表面标志物

CD105是细胞表面I型膜糖蛋白，在细胞迁移方面发挥重要作用。CD90广泛表达于各类干细胞的表面，涉及细胞间的粘附、迁移，若细胞贴壁能力缺失或产生接触抑制，CD90会有明显下降。

几种阴性标志物主要为血液类细胞的标志物，MSC不应有所表达。因此，对于高代次的MSC，CD105和CD90若正常表达，一般所有的指标都没有异常。GMP级间充质干细胞无血清培养基能够稳定维持高代次阳性标志物在98%以上。

P11表面标志物鉴定

三、贴壁生长

能够进行三系分化诱导是MSC的基本能力，理论上不应随着细胞传代而下降。曾有数据反馈MSC在连续传代的过程中会逐渐分化为成纤维样细胞，导致其三系分化能力下降。而成分限定级别的培养基能有效避免这一问题，在高代次下维持其三系分化能力稳定。

成脂                                                  成骨                                                      成软骨

本期我们聊了友康GMP级间充质干细胞无血清培养基所培养出的MSC的基本特性，贴壁能力的加强、表面标志物及三系分化的稳定显示出这款产品在MSC基本质量中的稳定性。下一期我们将用数期实验论证MSC检测学方面的优势，一点点揭开友康“GMP级间充质干细胞无血清培养基”的神秘面纱！