随着大量关于外泌体研究的开展,外泌体市场也愈来愈火热。为了满足众多外泌体行业探索者的探索热情,友康生物在今年初重磅推出了外泌体培养工作站——一款创新型的自动化外泌体生产设备,颠覆了传统的外泌体生产模式,迅速点燃了行业热情,吸引了众多研究人员的热烈关注。
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我们为此举办了一系列关于外泌体自动化生产等相关内容的线上直播,详细展示了其工作流程、技术核心和外泌体产量等。在直播期间,我们收到了大量外泌体从业者关于工作站的咨询,特地汇总了关于外泌体培养工作站的常见问题,分享给大家。
▲关于外泌体工作站的提问
1、外泌体培养工作站最大工作体积是多少?
答:目前适用5L的体系,但是在现有的程序上扩容是非常简单的,所以如果需要,10L和15L的体系也可以培养。 2、外泌体培养工作站和片载+固定床有什么区别? 答:这台工作站是使用片状微载体+震荡平台的组合方式,在增加细胞生长基数的基础上,使用机械刺激的方式促进外泌体分泌,再搭配我们自主开发的补液程序和培养程序,实现简单便捷的外泌体收获。 3、外泌体培养过程中,做细胞计数吗? 答:中间不做计数,大部分使用微载体的小规模培养工艺在中间培养过程中计数都需要从体系中抽取微载体,这种行为存在风险,其次,还需要考虑微载体是否可降解,微载体取样是否均匀等复杂问题,因此在中间培养过程往往不做细胞计数。 4、怎么检测细胞的状态呢? 答:在细胞生长过程中,细胞因营养竞争、自身状态等原因会发生细胞死亡的现象,在我们收集的上清液中只存在少量的死亡细胞,就可以间接的说明细胞状态不错。同时,我们在开发阶段,对于不同培养时期的细胞状态进行验证,细胞在培养过程中状态是良好的。 5、机械损伤怎么避免呢? 答:机械损伤很难避免,像我们平时养细胞,吹打、离心这样的操作都会对细胞产生机械损伤,所以我们一般在原则是尽量减少机械损伤,而震荡这种方式在理论上是减少机械损伤最有效的方法之一。 6、外泌体培养工作站和一般的生物反应器有区别吗? 答:外泌体培养工作站和一般的生物反应器相比,它比反应器更灵活、更安全、成本更低。一般生物反应器往往体系庞大,为了避免污染给企业造成损失,一般会配套清洗和灭菌设施,这些设施往往造价昂贵,此外生物反应器需要清洁,就要考虑清洁是否干净的问题,因而也存在安全风险。工作站使用一次性管路系统,不需要像生物反应器一样清洗、灭菌,因此不需要配套清洗和灭菌设施,而且针对中小型体系,因而工作站更灵活、更安全、成本更低。 7、培养基是专用外泌体制备的吗? 答:培养基用的是友康生物全新升级的GMP级间充质干细胞无血清培养基2.0,这款培养基产品性能更优秀,无论是细胞传代培养还是收获外泌体,均能够完美兼备。它全新升级配方,严格限制培养基背景外泌体含量,使其更有利于外泌体的纯化工作。同时,还显著改善细胞贴壁与适应能力,能在低接种密度下实现高扩增倍数,且一传到底,适配细胞工厂、微载体、生物反应器等2D及3D大规模培养模式。 8、制备外泌体和收获细胞冲突吗? 答:有一定影响,细胞在快速增殖过程中分泌的外泌体并不多,等细胞达到一定数量时才会有大量外泌体产出,所以为了多获得外泌体,往往会延长培养,会错过细胞的最佳传代或收获时间。 9、一般5L培养体系收获多少外泌体? 答:一般情况下,使用友康外泌体培养工作站,大多数样本最终能收获纯化后25万亿左右的外泌体产量。 10、收获的外泌体上清如何纯化? 答:目前的外泌体纯化技术已经较为成熟,市场上有一些第三方检测公司可以提供外泌体纯化、鉴定等服务,大部分采用切向流过滤方法,处理样品时间快速,占地面积小,处理成本比较经济实惠。 11、外泌体整个生产过程需要几天? 答:外泌体整个生产过程需要15天,即为一个周期,每3天更换一次培养基、收获一次培养上清,15天后会得到5L培养上清,经纯化后就能收获大约25万亿左右的外泌体。