circCDK13-loaded small extracellular vesicles accelerate healing in preclinical diabetic wound models

由于人口老龄化进程加速、不健康的饮食习惯以及缺乏运动等原因，全球范围内糖尿病患者的数量持续攀升。根据国际糖尿病联合会（IDF）等组织发布的数据，2021年全球约有5.37亿人患有糖尿病，而中国是全球糖尿病患者人数最多的国家。糖尿病会增加患心脏病、中风、肾脏疾病、视网膜病变、神经病变等多种并发症的风险，严重影响了患者的生活质量，并造成了巨大的经济压力。

糖尿病患者的慢性难愈性伤口是这一疾病的主要并发症之一，高血糖控制不佳与糖尿病皮肤病变的发生和发展密切相关。晚期糖基化终产物（AGEs）在糖尿病伤口中影响皮肤修复细胞的功能状态，导致伤口愈合延迟，但其分子机制尚不清楚，现有干预措施的治疗效果不理想。因此，探索糖尿病慢性伤口的分子机制，并寻找新的治疗方法，具有重要的临床意义。

-circRNAs是内源性非编码RNA的高度保守家族的新成员，在许多疾病中发挥关键的基因表达调节作用，一些circRNAs可能作为治疗糖尿病伤口的靶点。

-sEVs是脂质双层膜封闭的纳米级颗粒，已被认为是关键的细胞间信使，通过转移RNA、DNA和蛋白质发挥作用，与细胞治疗相比具有更高的稳定性、更低的免疫原性、更少的伦理问题和更低的栓塞和致瘤风险，有望作为高效的药物递送载体。

-间充质干细胞衍生的sEVs（MSC-sEVs）可促进伤口愈合，使用MSCs制备携带circRNA的工程化sEVs可能进一步增强MSC-sEVs促进伤口愈合的功效。

*通过分析糖尿病足溃疡（DFU）和正常伤口（NW）的微阵列数据，筛选出circCDK13作为潜在的治疗靶点。

*验证circCDK13在糖尿病伤口修复中的作用，并通过RNA pull-down 和RIP-qPCR等技术探究其与胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3（IGF2BP3）的相互作用机制。

*构建circCDK13过表达的工程化细胞外囊泡（sEVs），并验证其对糖尿病伤口修复的促进作用。

*circCDK13在DFU中表达下调，与糖尿病伤口愈合延迟密切相关。

*circCDK13通过与IGF2BP3相互作用，形成circRNA-蛋白-mRNA三元复合物，增强CD44和c-MYC mRNA的稳定性，从而促进真皮成纤维细胞（HDFs）和人表皮角质形成细胞（HEKs）的增殖和迁移。

*circCDK13过表达的工程化sEVs（circCDK13OE-sEVs）可以逆转AGE-BSA和高糖环境对HDFs和HEKs增殖和迁移的抑制作用。

*circCDK13OE-sEVs在db/db糖尿病小鼠和STZ诱导的I型糖尿病大鼠模型中加速伤口愈合，促进再上皮化、肉芽组织形成和皮肤附属器官再生。

这一发现不仅为我们理解糖尿病伤口愈合的分子机制提供了新的视角，也为开发新型的治疗手段提供了有力的支持。将circCDK13装载到sEVs中进行局部给药，有望成为一种安全、有效的糖尿病伤口愈合的治疗方法，为患者带来福音。