无菌控制专题（三）|细胞疗法中输入材料的风险控制

在供体选择和细胞收集的过程中，存在多种风险，这些风险可能涉及供体的健康状况、细胞质量、操作过程等多个方面。供体可能患有未检测出的传染病或遗传性疾病，这些疾病可能通过细胞传递给受者；细胞收集过程中可能存在操作不当导致的污染、损伤等问题。

自体细胞（患者特异性）：根据 21 CFR 1271.90（a）（1），自体细胞不需要进行供体资格确定或传染性病原体的供体筛查。然而，由于供体中可能存在病原体，应确定生物加工是否会因供体中存在的病原体进一步传播而增加对受体的风险，从而在给药时可能导致感染。

同种异体细胞（通用）：对于同种异体细胞或组织，制造商必须按照 21 CFR 第 1271 部分的要求进行供体筛查和测试。所有类型细胞和组织的供体都必须针对相关传染性病原体和疾病的风险因素和临床证据进行筛查。如果使用脐带血或其他母源性组织，必须对产妇进行筛查和测试。

自体和同种异体细胞培养物仅针对细菌内毒素、无菌性和支原体进行测试。此外，同种异体细胞培养物和一些自体细胞培养物还需要针对血源性传染性病原体进行筛查。

不同来源的干细胞的相对微生物污染率可能为骨髓 > 脂肪组织 > 脐带血 > 外周血。这种风险等级与细胞收集方法的侵入性、环境控制和所需操作的数量有关。

对于骨髓或脂肪组织的采集，需要在手术室进行；对于脐带血的采集，需要做好产妇风险筛查；对于外周血的采集，需要进行皮肤消毒，在收集过程中转移前10毫升。

就微生物污染和人员安全而言，细胞收集、处理和递送的封闭系统优于开放系统。例如，使用封闭系统进行血液收集、细胞分离和洗涤以及静脉袋制备时，白细胞分离过程中微生物污染的风险降低。

二、细胞培养试剂的风险与控制

动物源性或人源性细胞培养基成分，如胎牛血清或人AB血清，具有潜在的更高微生物污染风险。

这主要是由于动物源性或人源性细胞培养基的原料来源更加复杂，血清的组分非常复杂，富含各种营养物质，更容易被微生物污染。另外，在血清采集、加工、储存和运输过程中，如果操作不当或环境条件不达标，都可能导致微生物的污染。

因此，目前细胞疗法实际应用和药物申报过程中，存在使用化学成分完全明确的无血清培养基的强烈趋势，避免不明组分带来微生物污染的风险。

化学成分明确的培养基由于其原料使用更苛刻，生产条件更严格，避免了因动物血清造成的病毒、支原体等污染风险，又具有较高特异性能够支持特定细胞更好成长，而且组分稳定，可大量生产，更方便下游产物分离和纯化，因此目前在科研及商业领域的应用愈加广泛。

由于细胞不能灭菌，因此细胞疗法生产工艺中使用的所有原材料和耗材都必须经过灭菌处理，不含细菌内毒素、病毒和支原体等污染物。耗材应无菌、无热原，最好是一次性使用，因为细胞疗法生产工艺中没有灭菌步骤。耗材一般都是通过伽马射线照射、环氧乙烷或其他合适的方法灭菌后购买的。灭菌工艺必须经过充分验证，因为这些组件可能会直接接触细胞。

使用前应对耗材进行目视合格性检查（例如，应观察到无泄漏）；无菌性、内毒素和完整性在经认证的供应商证书上进行确认。如果材料不透消毒剂，可在使用前对耗材一次性包装的外部进行消毒，以进一步降低微生物污染的风险。

耗材的另一个关键方面是，它们通常是为最终用户定制的，因此必须考虑业务因素，以确保持续供应。应注意耗材是否能满足生产工艺的需要。耗材应便于通过管焊接或其他先进的无菌连接方式进行先进的无菌操作，并将引入微生物污染的风险降至最低。

在细胞疗法中，对输入材料的风险控制是确保治疗效果和患者安全的重要环节。通过严格进行供体检查和细胞收集、选择高质量培养基和耗材、优化制备和储存过程以及规范操作等措施，可以有效降低输入材料的风险，提高细胞疗法的安全性和有效性。同时，建立完善的质量管理体系和风险控制机制也是保障细胞疗法成功实施的重要保障。